Isabella van Portugal
 * 24-10-1503 te Lissabon
 † 01-05-1539 te Toledo

x met
Karel V
 * 24-02-1500 te Gent
 † 21-09-1558 te Cuacos de Yuste

Filips II van Spanje
 * 21-05-1527 te Valladolid
 † 13-09-1598 te San Lorenzo de El Escorial

x (1) 1543 met
Maria Emanuela van Portugal
 * 15-10-1527 te Coimbra
 † 12-08-1545 te Valladolid

x (2) 1554 met
Mary I Tudor (Bloody Mary)
 * 18-02-1516 te Greenwich
 † 17-11-1558 te Londen

x (3) 22-06-1559 te Parijs met
Elisabeth van Valois
 * 02-04-1545 te Fontainebleau
 † 03-10-1568 te Aranjuez

x (4) 04-05-1570 te Praag met
Anna van Oostenrijk
 * 02-11-1549 te Cigales
 † 26-10-1580 te Madrid

Maria van Spanje
 * 21-06-1528 te Madrid
 † 26-02-1603 te Villa Monte

Johanna van Habsburg
 * 24-06-1535 te Madrid
 † 07-09-1573 te San Lorenzo de El Escorial

Nog 3 jong gestorven kinderen

Carlos van Spanje (1)
 * 08-07-1545 te Valladolid
 † 24-07-1568 te Madrid

Isabella van Spanje (3)
 * 12-08-1566 te Segovia
 † 01-12-1633 te Brussel

x 15-11-1598 te Ferrara met
Albrecht van Oostenrijk
 * 15-11-1559 te Wiener Neustadt
 † 13-07-1621 te Brussel

Catharina van Spanje (3)
 * 10-10-1567
 † 06-11-1597

5 kinderen (4)

3 jong gestorven kinderen